Mikroskop fluoresensi minangka jinis mikroskop optik sing nggunakake sumber cahya intensitas dhuwur kanggo madhangi spesimen lan excite fluorochromes ing sampel. Iluminasi spesimen biasane ditindakake kanthi sumber cahya sing ngetokake sinar ultraviolet. Iki digunakake kanthi wiyar ing bidang biologi, medis lan industri.
Kepiye cara kerja mikroskop fluoresensi?
Mikroskop fluoresensi nggunakake lampu merkuri utawa xenon kanggo ngasilake sinar ultraviolet. Cahya teka menyang mikroskop lan tekan pangilon dichroic - pangilon sing nuduhake sawetara dawa gelombang lan ngidini sawetara liyane bisa liwat. Pangilon dichroic nggambarake sinar ultraviolet nganti spesimen. Sawetara spesimen fluoresensi kanthi alami ing sinar ultraviolet amarga ngemot zat fluoresensi kayata klorofil. Yen spesimen sing bakal dideleng ora kanthi alami fluoresce, bisa diwarnai nganggo pewarna fluoresensi sing diarani fluorochromes.
Apa sing kalebu mikroskop fluoresensi?
1. Sumber cahya
Sumber cahya sing paling umum yaiku merkuri, xenon, lan LED. Mercury nyedhiyakake kualitas cahya sing paling apik kanggo mikroskop fluoresensi. LED dadi luwih populer amarga luwih murah tinimbang sumber liyane lan nggunakake daya sing kurang.
| Lampu Mercury Kab | Lampu Xenon Kab | LED | |
| Dawane gelombang cahya sing dipancarake | 350-370 nm | 400nm ~ 450nm | 400-700 nm |
| Umur (jam) | 200-300 | 400-600 | 10000 |
| Kaluwihan | 1. Cahya Intensitas Dhuwur, Sumber Cahya Paling Umum. 2. Iku emits kuwat ultraviolet lan biru-violet kanggo excite kabeh jinis fluorophores. 3. Gambar padhang lan warni. | 1. Intensitas spektral stabil. 2. intensitas spektral kuwat ing infrared lan mid-infrared. | 1. Gampang kanggo ngganti. 2. Ora perlu anget. 3. Bisa diuripake lan dipateni langsung. 4. Ngontrol intensitas sumber cahya. |
| Kakurangan | 1. A Short Lifetime. 2. Wektu anget nganti suwe. | 1. kothak daya DC voltase kurang khusus dibutuhake kanggo keluwihan panas. 2. Luwih larang tinimbang Mercury Lamp | 1. Sinar UV luwih lemah tinimbang lampu merkuri. 2. Saben dawa gelombang cahya mbutuhake LED kapisah amarga bandwidths sempit padha emit. |
Lampiran Mercury Fluorescent
Lampiran LED Fluoresensi
2. Filter kasenengan
Filter eksitasi penting kanggo operasi mikroskop fluoresensi. Iki ngliwati cahya kanthi dawa gelombang sing luwih cendhek, sing bisa diserap dening pewarna neon. Uga, mblokir sumber cahya sing nyenengake.
Filter Eksitasi (B,G,U,V)
3. Pangilon Dichroic
Pangilon dichroic minangka jinis panyaring optik sing nggambarake cahya ing dawa gelombang tartamtu nalika ngirim liyane. Iki digunakake ing mikroskop fluoresensi kanggo misahake dawa gelombang eksitasi lan emisi.
4. Filter emisi
Filter emisi mung ngliwati dawa gelombang sing dipancarake fluorofor lan ngalangi kabeh cahya sing ora dikarepake ing njaba pita iki - utamane dawa gelombang eksitasi.
5. Pewarna neon
Pewarna fluoresensi minangka senyawa organik sing nduweni sifat fluoresensi, sing bisa mbentuk gambar neon kanthi ngetokake cahya ijo sing katon kontras banget sawise bungah amarga sinar ultraviolet sing madhangi banget. Pewarna fluoresensi sing umum digunakake yaiku; DAPI (49,6-diamidino-2-phenylindole), oranye acridine, auramine-rhodamine, Alexa Fluors, utawa DyLight 488.
Pira jinis mikroskop fluoresensi?
1. Mikroskop Epifluoresensi Tegak:
Iki minangka jinis mikroskop fluoresensi sing paling umum. Eksitasi fluorophore lan deteksi fluoresensi ditindakake liwat jalur cahya sing padha (yaiku liwat obyektif). Mayoritas mikroskop fluoresensi, utamane sing digunakake ing ilmu urip, yaiku desain epifluoresensi.
BS-2081F Research Fluorescent Biological Microscope
2. Mikroskop Fluoresensi Konfokal:
Mikroskop Fluoresensi Konfokal: Mikroskop fluoresensi jinis iki nggabungake pemindaian laser karo katerangan neon kanggo ngasilake gambar. Bisa digunakake ing macem-macem aplikasi, kayata sinau sel lan jaringan, ndeteksi protein lan zat liyane ing sel, lan ngukur kekandelan bahan.
BS-2081F Research Fluorescent Biological Microscope
3. Mikroskop Fluoresensi Inverted
Sumber cahya lan kondensor mikroskop iki dumunung ing sisih ndhuwur, madhep mudhun. Sudut katerangan kudu 90 derajat karo permukaan spesimen sing diteliti.
BS-2095F Inverted Fluorescent Microscope
Apa kaluwihan lan kekurangan mikroskop fluoresensi?
Kaluwihan:
- Mbisakake pengamatan sel ing organisme urip tanpa ngrusak
- Nyedhiyakake gambar kanthi resolusi dhuwur kanthi warna sing akurat
- Ngidini sinau babagan proses urip ing sel
- Digunakake kanggo ngenali macem-macem jinis molekul ing njero sel, kayata protein utawa asam nukleat.
Kekurangan:
-Iku mung ngidini pengamatan struktur tartamtu ing sel sing diwenehi pewarna fluoresensi.
-Photobleaching amarga eksitasi elektron sajrone proses fluoresensi bisa mengaruhi molekul reaktif saka pewarna fluoresensi. Akibaté, pewarna reaktif bisa ilang sifat kimia saka intensitas emisi fluoresensi.
-Sèl-sèl kasebut rentan marang efek fototoksik sawise diwarnai nganggo pewarna neon, amarga molekul fluorophore nyerep foton energi dhuwur saka cahya dawa gelombang cendhak.
Apa aplikasi saka mikroskop fluoresensi?
Mikroskop fluoresensi akeh digunakake ing macem-macem bidang riset lan aplikasi kalebu biokimia, biologi sel, mikrobiologi, imunologi, lan obat-obatan.
1. Ing bidang biologi, mikroskop fluoresensi mbisakake identifikasi sing akurat lan rinci babagan komponen lan aktivitas seluler seluler lan submikroskopik kanthi bantuan label pewarna fluoresensi.
2. Ing lapangan medis, mikroskop fluoresensi bisa nggunakake reagen fluoresensi kanggo ndeteksi anané lan distribusi bakteri lan virus, utawa kanggo mbantu labeling target bedah kanggo nggampangake operasi.
3. Ing bidang mineralogi, mikroskop fluoresensi asring digunakake kanggo nyinaoni zat kanthi sifat fluoresensi spontan, kayata aspal, petroleum, batu bara, graphene oxide lan mineral liyane.
4. Ing ilmu material, mikroskop fluoresensi bisa digunakake ing industri tekstil utawa industri kertas kanggo nganalisa bahan adhedhasar serat.
Posting wektu: Mar-14-2023